hrpZ_(Psta)在转基因大豆中定量表达与疫霉根腐病和灰斑病抗性相关研究

以T5转hrpZPsta基因大豆JN29-705-15和JL30-187为材料,利用实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real Time PCR,qRT-PCR)检测了目标基因在转基因大豆不同组织中的表达量,分别利用下胚轴侵染法和叶面喷施法鉴定疫霉根腐病抗性和灰斑病抗性,并分析目的基因表达量与疫霉根腐病和灰斑病抗性的相关性。结果表明:hrpZPsta基因在大豆的叶、茎、根、籽粒中均有表达,二个株系平均相对表达量分别为8.2/6.1、0.9/0.7、6.5/4.6和0.8/0.7;T5转hrpZPsta基因大豆抗疫霉根腐病和灰斑病能力与野生型相比均有所提高,JN29-705-15对疫霉根腐病抗性从感病提高到中抗,而JL30-187从中抗提高到抗病;hrpZPsta基因在叶中的表达量也与抗灰斑病能力呈正相关,与病情级别呈极显著负相关。试验结果初步证明了外源基因hrp ZPsta在大豆植株中的表达量与受体植株对疫霉根腐病和灰斑病抗性存在一定的相关性。     

检测马疱疹病毒4型抗体间接ELISA方法的建立及应用简

In order to establish an indirect ELISA method for detection of equine herpesviruses type 4 （EHV4） antibody, the glycoprotein G （gG） protein with specific epitope worked as a detection antigen. After optimizing conditions, the indirect ELISA method was developed successfully，specificity and repeatability tests were determined. The result was that the EHV4 gG only reacted with antibodies against EHV4;but not with antibodies against EHV1; both the intro-batch and inter-batch variation coefficiencies were lower than 10%.Concordance of the indirect ELISA relative to commercial EHV1/4 antibody kit was above 90%.The results indicated that the indirect ELISA method could be used for the detection and epidemiological surveys of EHV4 infection.     

微胶囊技术及其在食品工业中的应用研究

利用微胶囊技术,可以解决传统工艺所不能解决的众多问题,生产出多种高新产品,且具有良好的功能性质和贮存稳定性。介绍微胶囊技术的特点,壁材、芯材的类型,制备方法、原理,以及其在饮料工业、乳制品、糖果、食品添加剂以及焙烤食品中的应用。     

泛素激活酶抑制剂对猪精子获能状态、膜重构及体外受精的影响

【目的】评估泛素激活酶（E1）对猪精子获能、膜重构和体外受精的影响。【方法】选取5头长白猪采集精液，以硫醇酯法评估泛素激活酶（ubiquitin activating enzyme，E1）抑制剂（TAK-243）对精子中泛素（ubiquitin，Ub）与E1结合的影响；将精子分为鲜精组（Fresh）、DMSO组（DMSO）、获能组（Capacitated）及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243组，鲜精组用2 mL PBS重悬精子沉淀；获能组用2 mL获能液重悬精子沉淀；DMSO组及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243组分别用2 mL含0.07% DMSO及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243的获能液重悬精子沉淀，使用微生物动（静）态图像检测系统检测精子的动力学参数；以Western blotting法检测精子的酪氨酸磷酸化水平；Zn²⁺荧光探针检测精子的Zn²⁺含量；花生凝集素染色检测精子的顶体膜重构；免疫荧光法检测顶体表面精子黏附蛋白（AQN-1、AWN）的表达；体外受精法检测TAK-243对精卵结合和卵裂率的影响。【结果】硫醇酯分析结果表明，TAK-243处理组精子未形成Ub-E1复合物，说明TAK-243抑制了E1对Ub的激活作用。与鲜精组相比，获能组精子的曲线速度（VCL）和平均鞭打频率显著升高（P<0.05）。3个浓度TAK-243组与获能组精子的各项动力学参数差异均不显著（P>0.05）。与获能组相比，3个浓度TAK-243组酪氨酸磷酸化水平均显著降低（P<0.05），且随着TAK-243浓度的增加，精子蛋白的酪氨酸磷酸化水平逐渐降低。后续试验使用7.2 nmol/L TAK-243进行精子中Zn²⁺水平和顶体膜重构的研究，其结果表明，与获能组相比，7.2 nmol/L TAK-243组Zn²⁺水平、顶体膜完整性及AQN-1和AWN蛋白的表达水平均显著增加（P<0.05），精子与卵母细胞的黏附率和卵裂率均显著降低（P<0.05）。【结论】7.2 nmol/L TAK-243显著降低了精子获能期间蛋白酪氨酸磷酸化水平、精卵结合率和卵裂率，显著增加了Zn²⁺含量、顶体膜完整率及顶体表面蛋白AWN和AQN-1的表达，说明泛素-蛋白酶体信号通路参与了精子的体外获能。     

两种野生郁金香在沈阳地区的引种驯化

以阿尔泰郁金香和天山郁金香鳞茎为试材,采用异地人工驯化栽培的方法,研究了不同栽培条件和基质对2种野生郁金香主要观赏性状的影响,以期为我国野生郁金香的开发和利用提供理论指导。结果表明:2种野生郁金香可以在沈阳地区成功驯化,除株高明显降低外,其它观赏性状基本保持了原有的生物学特性。在沈阳地区露地栽培时萌芽期、展叶期、现蕾期、变色期较原生地晚14d左右,结实期和果熟期均与原生地接近;在沈阳地区温室栽培过程中,2种郁金香的萌芽期、展叶期早于露地28d左右,始花期、盛花期和结实期较露地提前14d,果熟期较露地提前10d;使用腐殖土为栽培基质时,2种郁金香的植株高度最高,分别为15.03cm和19.47cm。     

陕北地区秦川牛及其多个杂交后代群体的遗传多样性

为了解陕北地区黄牛的遗传多样性及遗传背景,采用直接测序技术对55头饲养在陕北榆林地区的秦川牛及其多个杂交后代群体的线粒体DNA D-loop区826bp序列进行测定。结果表明,榆林地区黄牛D-loop区序列A+T平均含量为61.5%,G+C含量38.5%;共检测到33种单倍型和84个变异位点,核苷酸多样度(π)为0.021 43,单倍型多样度(h)为0.970,表明陕北榆林地区的黄牛具有丰富的遗传多样性。NJ法聚类结果显示,该地区的黄牛品种或群体有2个母系起源。     

扇贝养殖海区中小型浮游生物携带AVNV的荧光定量检测

为了解中小型浮游生物与扇贝急性病毒性坏死症(AVND)的流行传播关系,于2009年对青岛流清河与荣成桑沟湾2个不同扇贝养殖海区的浮游生物进行了采样调查,利用荧光定量PCR(Fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)技术对所采集样品携带急性病毒性坏死病毒(AVNV)的情况进行了定量检测.结果表明,2个扇贝养殖海区的浮游生物样品均检测到AVNV,而且不同粒径的浮游生物携带AVNV载量有差异(P<0.05):小于200目粒径的浮游生物携带AVNV载量最大,达到9.45×106 copy/mg (DNA)； 60～200目粒径的浮游生物次之,大于60目粒径的浮游生物携带量最少,仅为5.81×104 copy/mg(DNA).在上述2个扇贝养殖海区,均在8月份检测到浮游生物携带AVNV.该结果与栉孔扇贝夏季大规模死亡在时间上是吻合的.结论认为,中小型浮游生物可以携带AVNV,并有可能在扇贝急性病毒性坏死症的流行和传播中起到传播媒介的作用.     

条斑星鲽卵巢发育规律和性类固醇激素周年变化研究

采用组织学方法、形态测量法、放射免疫法(RIA)等技术方法,研究了人工养殖条件下条斑星鲽雌性亲鱼卵巢发育成熟和性类固醇激素的年周期变化规律.结果表明,条斑星鲽属于非同步分批产卵类型.卵母细胞按其组织学特点可分为6个时相,卵巢发育依据其形态特征可划分为相应的6个时期.卵巢年周期发育过程中,性腺指数(GSI)、肝脏指数(HSI)和肥满度(CF)发生变化,表现出与性腺发育协同一致的变化规律.统计分析表明,卵巢年周期发育过程中,GSI和HSI值与CF值都存在显著的正相关关系,GSI值的变化与水温调控呈显著的负相关关系.亲鱼血浆中雌二醇(E2)在6月份开始升高,9月份达到年周期中的第1个小高峰,翌年2月份,E2表达水平达到最高峰值,4月产卵结束后,E2表达水平降低并维持较低水平至下一个生殖季节.血浆中睾酮(T)含量在7月达到第1个峰值,并在翌年1月份达到第2个峰值,在4月份产卵后降至最低水平并维持至下一个生殖季节.统计分析表明,E2与T存在正相关关系,E2与光周期调控存在正相关关系,同时与GSI和CF呈弱的正相关关系.     

封闭循环水系统中养殖密度对大菱鲆生长和免疫的影响

研究了大菱鲆幼鱼在封闭循环水系统中养殖密度对其摄食、生长、饲料利用率及免疫机能的影响。实验设计了4组不同处理,初始养殖密度分别为0.66 kg/m2、1.26 kg/m2、2.56 kg/m2、4.00 kg/m2,每个密度组设3个重复,为期100 d,实验结束时养殖密度分别为4.67 kg/m2、7.25 kg/m2、14.16 kg/m2、17.77 kg/m2。结果表明:大菱鲆生长速度与养殖密度呈负相关,各实验组的持定生长率(SGR)值分别为2.67、2.33、2.29、1.98;随着养殖密度的增加,各实验组大菱鲆的体重差异度出现显著变化(P<0.01);大菱鲆的饵料系数与养殖密度呈正相关,实验组1的饵料系数为0.70;实验组4的饵料系数为0.76;养殖密度对大菱鲆的免疫指标碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)及肝脏的脏器系数的影响不大。本实验结果可为鱼类循环水工厂化养殖管理提供参考。     

洛阳地区园林常绿阔叶树种资源及其应用

为了对洛阳市的生态环境建设提供参考,对洛阳地区常绿阔叶树种进行了实地调查.结果表明,洛阳地区园林中应用的常绿阔叶树种共有58种,其中,乔木9种,灌木39种、藤本4种及竹类6种;野生常绿阔叶树种10余种.并针对应用中存在的问题,提出相应的发展对策.